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說(shuō)明: 在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸 (PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細(xì)胞凋亡早期,細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸 (PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V是種分子量為35~36 kD 的Ca2+依賴(lài)性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸具有高度親和力,故可通過(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)合。因此Annexin V被公認(rèn)為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之。將Annexin V進(jìn)行綠色熒光(FITC或EGFP)標(biāo)記,以標(biāo)記了的Annexin V作為探針,利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是種核酸染料,它不能透過(guò)正常細(xì)胞或早期凋亡細(xì)胞的完整的細(xì)胞膜,但對(duì)凋亡中晚期的細(xì)胞和壞死細(xì)胞,PI能夠透過(guò)細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此將Annexin V與PI匹配使用,就可以將處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞區(qū)分來(lái)。
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